结晶紫染色法(结晶紫染色法结果)

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结晶紫染色法(结晶紫染色法结果)

2年前 (2022-08-20)电台1130

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细胞侵袭实验,用结晶紫染色方法如何做?

① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞② 染色:采用0.1%结晶紫染色。这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接反映细胞数。结晶紫一染就出来了,我做的时候没做固定,用的结晶紫浓度较高0.5%,摇了5分多钟的板子,镜下就直接可以看到染上色的细胞了。感谢您的采纳啦

结晶紫染色的原理是什么?染细胞的哪个部分?染活细胞还是死细胞?若染活细胞,染后细胞是否已经死亡?

结晶紫是碱性染料,可以与细胞核中的核酸结合把核染成蓝色。

无论活细胞还是死细胞都可以染色,但要染活细胞必须控制浓度。

结晶紫染液、番红染液如何配制?

1、结晶紫染液:结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL 将两液混匀置24h后过滤即成。

2、番红溶液:番红O(safranine,又称沙黄O)2.5g, 95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。

结晶紫染液、番红染液都是革兰氏染色液的两种主要试剂,革兰氏染色剂不仅用来观察细菌的形态,而且它还是细菌鉴定的重要方法,它可将全部细菌区分别革兰氏阳性菌和阴性菌两大类。

扩展资料:

一、革兰氏染色法的步骤为:

涂片→固定→结晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脱色→番红复染→水洗→干燥→观察。

二、结晶紫染色法测定细胞数

1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。

2、用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3~5倍递次稀释待检样品,每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品,每个稀释度3个重复孔。

对照孔6个,3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液,3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18~24小时。

3、甩去培养液,用PBS小心洗涤一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定细胞30秒钟。

4、吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml结晶紫染液,室温中放置20分钟。

5、轻轻甩去染色液,用蒸馏水洗涤各孔,将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。

6、测定前,每孔加0.1ml 33%醋酸脱色,充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度(OD)值对样品稀释度作图,比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活性

参考资料:百度百科—番红

参考资料:百度百科—结晶紫染液

结晶紫染色的原理是什么?染细胞的哪个部分

结晶紫是一种碱性染料,可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色。

结晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。用于革兰氏染色。

结晶紫也可称之为龙胆紫。当它溶解后,可以被活细胞摄入。同时可以使DNA、蛋白质、脂肪着色。染色显示细胞核呈蓝色,细胞质呈粉红色。肉眼显示整个细胞呈深蓝色。在分光光度计或酶标仪上可以进行定量分析以评价细胞生长繁殖情况。

扩展资料:

染色法着色灭活菌是细菌形态学检测的常用方法,广泛应用于临床实验室。而活体细菌的着色检测有实际应用价值。为此我们首次通过苯胺染料结晶紫染色细菌,探讨活体细菌着色的最佳浓度和染色时间,并对细菌保存液加以改进,旨在为活体细菌染色的形态学检测建立方法。

GENMED结晶紫细胞染色试剂是一种旨在使粘附生长的单细胞层细胞(群落)摄取结晶紫染料而获得细胞繁殖密度定量信息的广谱染色材料和权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明、顶级杂志推荐的。其适用的细胞是呈单细胞层(Monolayer)生长的人体和动物细胞。产品严格无菌,即到即用,性能长期稳定,细胞着色率100%。

技术背景

结晶紫也可称之为龙胆紫。当它溶解后,可以被活细胞摄入。同时可以使DNA、蛋白质、脂肪着色。染色显示细胞核呈蓝色,细胞质呈粉红色。肉眼显示整个细胞呈深蓝色。在分光光度计或酶标仪上可以进行定量分析以评价细胞生长繁殖情况。

参考资料来源:百度百科-草酸铵结晶紫染液

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