关于罗丹明b最大吸收波长多少的信息

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关于罗丹明b最大吸收波长多少的信息

2年前 (2022-10-13)星座32

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什么是吸收曲线?怎样根据吸收曲线去选择定量测定的合适波长

吸收曲线表示物质对各个波长光线的吸收能力。

吸收曲线的横坐标是波长,纵坐标是吸光度,或者摩尔消光系数,比如下图是罗丹明B染料的吸收曲线。

可见在横坐标500-600 nm范围内有一个很大的峰,这说明罗丹明B能吸收大量500-600 nm波长的光线。而其它的波长,比如600-700 nm这一段,吸光度基本为0,说明罗丹明B对这个波长的光几乎是透明的。

在波长为544 nm时,罗丹明B的吸收最大,这称为最大吸收波长。如果要进行定量分析,那么应当选择最大吸收波长作为测定的波长,因为这样信号最强,灵敏度和信噪比最高。当然,如果样品中可能有其它杂质也在这个波长有强吸收,有时也不得不选则其它的波长,比如在最大吸收波长附近选一个相对较强的吸收波长。

罗丹明b可燃吗

罗丹明b不可燃。罗丹明B,又称若丹明B、玫瑰红B、玫瑰精B、碱性玫瑰精,分子式为C28H31ClN2O3,是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。易溶于水、乙醇,微溶于丙酮、氯仿、盐酸和氢氧化钠溶液,不具有可燃性。

罗丹明b性状描述:绿色结晶或红紫色粉末,易溶于水、乙醇,微溶于丙酮、氯仿、盐酸和氢氧化钠溶液;水溶液为蓝红色,稀释后有强烈荧光,其水溶液加入氢氧化钠呈玫瑰红色,加热后产生絮状沉淀。于浓硫酸中呈黄光棕色,带有较强的绿色荧光,稀释后呈猩红色,随后变为蓝光红色至橙色。醇溶液为红色荧光,最大吸收波长554nm,最大荧光波长610nm,激光峰值波长610nm,调谐范围578~610nm。

常用的荧光物质

荧光物质都有哪些呢?

(一)荧光色素

1.异硫氰酸荧光素(FITC):呈现明亮的黄绿色荧光。

2.四乙基罗丹明(RB200):呈橘红色荧光。

3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):呈橙红色荧光。

4.藻红蛋白(R-RE):呈明亮的橙色荧光。

(二)其他荧光物质

1.镧系螯合物:其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围宽,发射光波长范围窄,荧光衰变时间长,最适合用于时间分辨荧光免疫测定。

2.酶作用后产生荧光的物质:4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷本身无荧光,受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光。其他如碱性磷酸酶的底物是4-甲基伞酮磷酸盐,辣根过氧化物酶的底物是对羟基苯乙酸等。

荧光色素

许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有:

1.异硫氰酸荧光素(FITC):为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4,最大吸收光波长为490~495nm,最大发射光波长520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。其主要优点是:①人眼对黄绿色较为敏感;②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。

2.四乙基罗丹明(RB200):为橘红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮。性质稳定,可长期保存。最大吸收光波长为570nm,最大发射光波长为595~600nm,呈橘红色荧光。

3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):最大吸引光波长为550nm,最大发射光波长为620nm,呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合,但荧光效率较低。

4.藻红蛋白(R-RE):本品为无定形,褐红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮,性质稳定,可长期保存。最大吸引光波长为565nm,最大发射光波长为578nm,呈明亮的橙色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明,故被广泛用于对比染色或用于两种不同颜色的荧光抗体的双重染色。

其他荧光物质

1.酶作用后产生荧光的物质:某些化合物本身无荧光效应,一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷,受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光,激发光波长为360nm,发射光波长为450nm。其他如碱性磷酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。

2.镧系螯合物:某些3价稀土镧系元素如铕(Eu3+)、铽(Tb3+)、铈(Ce3+)等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光,其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围宽,发射光波长范围窄,荧光衰变时间长,最适合用于分辨荧光免疫测定。

紫外分光光度计测量罗丹明B浓度

紫外分光光度计全名是叫紫外-可见分光光度计,一般包括紫外和可见两个区域,这时候你可以选用便宜的玻璃吸收池,石英吸收池在紫外,可见两个区域都可用。另外应该不包括红外区域。另外如果不是全波扫描,手动式测量,好像还要注意灯拨的位置,是属于紫外还是可见

最大吸收光波长为570nm的荧光色素是

正确答案:B

解析:四乙基罗丹明(

RB200)最大吸收波长为570

nm,最大发射光波长为595~600

nm,为橘红色荧光

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