proteina(proteinag磁珠)

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proteina(proteinag磁珠)

1年前 (2022-12-22)电台21

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常常听说别人讲proteinA,请问这代表什么,和其他的蛋白质有什么区别?

从A型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)分离而得的一种细胞壁蛋白。类白色粉状。分子量42 000。溶于水。具有不在抗原结合点而与免疫球蛋白结合的性质。能形成含有A蛋白、抗体、抗原的复合物。

从G型链球菌分离而得的细胞壁蛋白。能与多种动物(兔、大鼠、豚鼠、牛、猫、小鼠、鸟、羊)的IgG的Fc区发生结合,以及与小鼠血清白蛋白发生结合。但不能与IgA和IgM结合。用于免疫分析和Ig提纯

protein a 纯化蛋白为什么防止气泡

因为Protein A柱的亲和配基在中性的条件下与具有Fc区域的蛋白结合,这种相互作用是可逆的,在改变pH的条件时亲和配基不再结合Fc区域的蛋白。通过流动相蛋白被洗脱下柱子。又因为Protein A柱的亲和配基在碱性条件下可能会从琼脂糖树脂上脱落,所以一般会选择酸性的洗脱条件。一般会用的洗脱液有醋酸醋酸钠缓冲液,甘氨酸盐酸缓冲液,柠檬酸柠檬酸钠缓冲液等等

所以过proteina柱纯化蛋白会用到醋酸。

protein a和protein g的区别

protein A特异性吸附的抗体种类比protein G的要少一些。

洗脱的时候protein G的pH要比protein A更低一些。

protein A现在有重组的蛋白,protein G好像目前使用的都是天然的。

protein G的填料要比protein A的贵不少。

如何去除抗体中的protein a

因为ProteinA在一般条件下是和抗体结合的,所以很难去除。最佳的降低ProteinA的残留的手段恐怕是换rproteinA介质,换用脱落量低的介质。其次,考虑优化工艺,减少脱落。

如果不幸的是你的抗体必须要“拯救”的话,那可以考虑再上一次ProteinA,增加Wash步骤。当然了,需要用脱落量低的介质。

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