薄层色谱法的优缺点(薄层色谱法的优缺点分析)

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薄层色谱法的优缺点(薄层色谱法的优缺点分析)

1年前 (2022-12-21)电台12

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薄层色谱法有哪些优点和特点??

优点:操作、显色比较方便,薄层色谱法斑点集中,薄层板耐腐蚀。

纸色谱法

点:操作、显色比较方便,以纸为支持剂,没有薄层色谱法铺层的麻烦;缺点:不能用腐蚀性显色剂,分离效果不如薄层色谱法斑点集中。

气相色谱法

优点:高效能、高选择性、高灵敏度、用量少、分析速度快、并可制备高纯物质。

液相色谱法

优点:高效能、高选择性、高灵敏度、用量少、分析速度快、并可制备高纯物质。

薄层色谱 优缺点

薄层色谱分析步骤及注意事项

薄层色谱法(thin layer chromatography简写TLC)是一种物理化学的分离技术,常用于药物的分离与分析。现对此方法的分析步骤及注意事项提点建议。

完成TLC分析通常需经制板、点样、展开、检出4步操作。

⑴制板

在一平面支持物(通常为玻璃)上,均匀地涂制硅胶、氧化铝或其他吸附剂薄层、样品的分离、检测就在此薄层色谱板上进行。

一般选用适当规格的表面光滑平整的玻璃板。常用的薄层板规格有:10cm×20cm、5cm×20cm、20cm×20cm等。称取适量硅胶,加入 0.2%~0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na),充分搅拌均匀,进行制板。一般来说10cm×20cm的玻璃板,3~5g硅胶/块;硅胶与羧甲基纤维素钠的比例一般为1:2~1:4。制好的玻璃板放于水平台上,注意防尘。在空气中自然干燥后,置1l0℃烘箱中烘0.5~lh,取出,放凉,并将其放于紫外光灯(254nm)下检视,薄层板应无花斑、水印,方可备用。

⑵点样

用微量进样器进行点样。点样前,先用铅笔在层析上距末端lcm 处轻轻画一横线,然后用毛细管吸取样液在横线上轻轻点样,如果要重新点样,一定要等前一次点样残余的溶剂挥发后再点样,以免点样斑点过大。一般斑点直径大于2mm,不宜超过5mm.底线距基线1~2.5cm,点间距离为lcm左右,样点与玻璃边缘距离至少lcm,为防止边缘效应,可将薄层板两边刮去 1~2cm,再进行点样。

⑶展开

将点了样的薄层板放在盛在有展开剂的展开槽中,由于毛细管作用,展开溶剂在薄层板上缓慢前进,前进至一定距离后,取出薄层板,样品组分固移动速度不同而彼此分离。

① 展开室应预饱和。为达到饱和效果,可在室中加入足够量的展开剂;或者在壁上贴两条与室一样高、

宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,密封室顶的盖。

② 展开剂一般为两种以上互溶的有机溶剂,并且临用时新配为宜。

③ 薄层板点样后,应待溶剂挥发完,再放人展开室中展开。

④ 展开应密闭,展距一般为8~15cm。薄层板放入展开室时,展开剂不能没过样点。一般情况下,展开剂浸入薄层下端的高度不宜超过0.5cm。

⑤ 展开剂每次展开后,都需要更换,不能重复使用。

⑥ 展开后的薄层板用适当的方法,使溶剂挥发完全,然后进行检视。

⑦ Rf值一般控制在0.3~0.8,当Rf值很大或很小时,应适当改变流动相的比例。

⑷ 斑点的检出

展开后的薄层板经过干燥后,常用紫外光灯照射或用显色剂显色检出斑点。对于无色组分,在用显色剂时,显色剂喷洒要均匀,量要适度。紫外光灯的功率越大,暗室越暗,检出效果就越好。

展开分离后,化合物在薄层板上的位置用比移值(Rf值)来表示。化合物斑点中心至原点的距离与溶剂前沿至原点的距离的比值就是该化合物的Rf 值。

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柱色谱和薄层色谱有什么异同

1、方法不同

柱色谱又称层析法。是一种以分配平衡为机理的分配方法。

薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂,待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上,晾干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。

待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。

2、原理不同

柱色谱包含两个相,一个是固定相,一个是流动相。当两相相对运动时,反复多次地利用混合物中所含各组分分配平衡性质的差异,最后达到彼此分离的目的。

薄色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同,或和其它亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组份分开。

扩展资料:

薄层色谱是一种微量、快速和简便的色谱方法。由于各种化合物的极性不同,吸附能力不相同,在展开剂上移动,进行不同程度的解析,根据原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离,计算比移值(Rf):

化合物的吸附能力与它们的极性成正比,具有较大极性的化合物吸附较强,因此Rf值较小。在给定的条件下(吸附剂、展开剂、板层厚度等),化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的,即Rf值是化合物的物理常数,其大小只与化合物本身的结构有关,因此可以根据Rf值鉴别化合物。

薄层色谱可适用小量样品(几到几十微克甚至0.01μg)的分离:也可用于多达500mg样品的分离,是近代有机化学中用于定性,定量的一种重要手段。特别适用于那些挥发性小的化合物,以及在高温下易发生化学变化而不能用气相色谱分析的物质。

吸附剂的要求

一种合适的吸附剂,一般应满足下列几个基本要求:

1、对样品组分和洗脱剂都不会发生任何化学反应,在洗脱剂中也不会溶解。

2、对待分离组分能够进行可逆的吸附,同时具有足够的吸附力,使组分在固定相与流动相之间能最快地达到平衡。

3、颗粒形状均匀,大小适当,以保证洗脱剂能够以一定的流速 (一般为1.5 mL·min-1)通过色谱柱。

4、材料易得,价格便宜而且是无色的,以便于观察。可用于吸附剂的物质有氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙 (镁)、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。其中有些对几类物质分离效果较好,而对其它大多数化合物不适用。

参考资料来源:百度百科-柱色谱

参考资料来源:百度百科-薄层色谱

制备薄层色谱法的优缺点是什么 ?简述制备薄层分离的过程,找出每一步骤的关键操作。

转载:《分析测试百科网》

PTLC的应用体会

PTLC也就是我们通常所说的制备薄层板,对于一些在TLC小板上分离度比较好的化合物,我们可以考虑用制备薄层来进行分离,进而得到单品。这个也算是实验室一种很常规的一种分离方法,大家应该有所体会。

下面就是我做PTLC的过程:

第一,铺板:称取30克的薄层硅胶,加入3倍量的千分之五的CMC-Na沿着一个方向搅匀,搅拌的时间大概在25分钟左右,当然个体存在差异,力气大的可能15分钟也可以搅的很匀。放在窗台晾干24小时也就可以使用了。

第二,洗板:在点样之前,先用纯甲醇把板洗一下,因为硅胶板中有一些杂质本身会影响我们的样品,一般会看到友一层淡黄色的带被推到最前沿,那就是杂质了,这样洗板的目的也就达到了,将洗好的板拿出来放在通风橱吹干待用。

第三,点样:这是关键的一步,若是点样点的不好,会非常影响我们制备薄层板的效果,严重的甚至达不到分离的目的。一般我是将样品溶液10-50mg(点样量不可过多,超载的话在展开的板上出现锯齿状,点也不可砸坏,会大大的影响效果)线性滴加于硅胶板上,尽量不要用水来溶解样品,否则会扩散的很严重,效果不好。

第四,饱和:先把展开剂(展开剂最好不要用水,甲醇等极性打的展开剂,可能会使硅胶,CMC-Na等一起洗下来)(20ml)左右放在展开槽一侧,把PTLC板放在另一侧30分钟进行预饱和,之后将展开剂倾斜倒入另一侧进行展开,这样可以避免边缘效应,目的还是一个,为了使我们的分离效更好。

第五,刮板:将上面展开后的板拿出吹干以后,确定自己要刮的范围,用铅笔画上即可,接着用刀片将所画的范围刮下来即可。将挂下的硅胶用小柱装上,用展开溶剂将其洗出即可,充的话尽量充干净,不然浪费的都是自己的样品啊。

我在制备TLC的时候就是上面的步骤了,这其中可能有一些我想的还不周到的地方,希望大家海涵!

优缺点要有对比才好说吧,

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